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- Última atualização: 25 Março 2021
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Eletroporador4D-Nucleofector - Lonza
Fonte financiadora: Convênio CT-INFRA FINEP 01.12.0361.03
A eletroporação é um método físico de transfecção, que permeabiliza a membrana celular através da aplicação de um pulso elétrico que move moléculas da membrana, gerando poros transitórios que permitem a entrada de biomoléculas exógenas (DNA, RNA e proteínas ) nas células. A eficiência de transfecção de grandes fragmentos de DNA por esse método é muito grande, tanto para a maioria das linhagens celulares contínuas, quanto para células primárias.
O eletroporador Nucleofector-4D (Lonza) exibe taxas de eficácia de transfecçãomais elevadas, quando comparado aos eletroporadores tradicionais, devido à optimizações metodológicas que aumentam a transfecção diretamente ao núcleo (“nucleofecção”). O Nucleofector-4D é equipado com a Unidade de Controle (Core Unit) e com o módulo operacional X, no qual células em suspensão podem ser transfectadas, seja em cubetasestéreis de 100μL, ou em “strips” estéreis com 16-wells (20 μL/poço), ideais para a optimização do método. Kits de transfecção, a serem adquiridos à parte pelos usuários, foram otimizados pelo fabricante para a transfecção para da maioria das linhagens comercialmente disponíveis.
Programas de eletroporação específicos para as mesmas linhagens podem ser acionados através do software de controle do Nucleo fector-4D. Tipos celulares não constantes da lista irão requerer a execução de um procedimento de optimização. Recomenda-se usar 1-5 x106 células nas cubetasde 100 μLe 2 x105 células nos 16-well strips. Os usuários interessados devem consultar informações detalhadas no site http://knowledge.lonza.com (LonzaKnowledgeCenter).
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- Última atualização: 24 Março 2021
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